产品简介：

尚宝研发生产的HPG-488蛋白合成检测试剂盒(HPG Protein Synthesis Kit with AF488)，也称HPG-488新生蛋白质检测试剂盒(HPG-488 Nascent Protein Assay Kit)，是一种基于蛋白合成过程中蛋氨酸(Methionine)类似物HPG (L-homopropargylglycine)的掺入，并通过随后的点击反应(Click reaction)使HPG被AF488所标记，从而实现简单、快速、高灵敏地检测新合成蛋白的试剂盒。

本试剂盒可以原位检测培养的活细胞中新生蛋白质的合成，并可以定量检测新生蛋白质的合成。该检测过程不需要放射性同位素(如35S-methionine)和抗体，只需要简单的两步反应即可完成。新生蛋白质又称新生蛋白、新生成蛋白质、初生蛋白质或新合成蛋白。

经本试剂盒处理后，有新合成蛋白的细胞在荧光显微镜下呈现非常明亮的绿色荧光，可以用于荧光显微镜、激光共聚焦显微镜或荧光酶标仪等检测，也可以用于高内涵筛选(High-content screening, HCS)。

HPG (L-homopropargylglycine)，中文名为L-高炔丙基甘氨酸，是一种蛋氨酸(Methionine)即甲硫氨酸的类似物，HPG可以在蛋白合成过程中替代蛋氨酸掺入到新合成的蛋白中。另一方面，HPG上的炔基能与荧光标记的小分子叠氮化物探针(如Azide Alexa Fluor 488、Azide Alexa Fluor 555、Azide Alexa Fluor 594、Azide Alexa Fluor 647等)通过一价铜离子的催化发生共价反应，形成稳定的三唑环，该反应非常迅速高效，被称作点击反应(Click reaction)，其反应原理参见图1。通过点击反应，新合成的蛋白会被相应的荧光探针所标记，从而可以使用适当的荧光检测设备检测到新合成蛋白。 

本试剂盒反应简单、检测灵敏度高。本试剂盒基于简单高效的点击反应，无需特殊温度，只需少量的小分子叠氮化物探针即可非常有效地标记掺入到新合成蛋白质的HPG，并且可以检测到单个细胞的蛋白合成情况，同时也能进行蛋白合成的总体活性检测。

本试剂盒使用便捷、兼容性好。本试剂盒只需常用的多聚甲醛固定和Triton X-100穿透，就可以使叠氮化物探针有效进入细胞并发生点击反应，不会影响细胞形态，不会产生多余的附加产物，不会影响基于抗体的免疫荧光和免疫组化检测，也不会影响DNA的荧光染色(如PI染色检测细胞周期、DAPI或Hoechst染料检测细胞核等)。

本试剂盒小包装如果用于6孔板培养细胞的检测，可以检测50个样品，每个样品的反应体系为500μl的Click反应液；如果用于96孔板检测，可以检测500个样品，每个样品的检测体系为50μl的Click反应液；如果用于12孔、24孔、48孔或384孔板样品的检测，分别可以检测125、250、350和1250个样品，每个样品推荐的Click反应液用量为200μl、100μl、70μl和20μl。