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生物实验中琼脂粉常见问题解答

日期:2017-03-13 16:50:13
生物实验中琼脂粉常见问题解答
问题1:使用琼脂粉配置的MS培养基颜色明显变黄?影响实验?
产品批次不一样,有些批次的琼脂粉就是显黄色,不是质量问题,不影响使用。
进口产品也有直接指出琼脂粉是黄色为正常现象。
问题2:凝胶强度?
答:凝胶强度(1.5%)≥
1.5g琼脂粉溶于100ml水,溶解凝固后要放置20℃恒温箱中静置10小时以上,再测定凝胶强度。与温度,水质等有关。
一般琼脂粉和卡拉胶,夏季使用浓度要比冬季偏高。夏季温度高,保存时间久,可能会有部分降解,所以要达到同样凝胶强度的用量就偏高。
问题3:琼脂粉不凝固
1、培养基PH值过低 ,偏酸,水解
2、所加琼脂量不够 ,增加用量。搅拌不均匀,倒板前没有充分摇匀,凝固不均匀。
3、琼脂质量不过关,琼脂条在使用时添加量要稍微高一点,琼脂粉是不是新买的4、灭菌温度过高,加热时间过长。PH改变或破坏了琼脂的凝固度5、培养基没有加热溶解够不够,就没有凝固。是不是琼脂加错了,营养琼脂不会凝固。
到平板时可以推荐在超净台内吹干晾干,蒸发过多水分。
问题4:PH与琼脂粉?
琼脂粉默认使用PH为中性,一般为7左右,PH小于4则无法凝结,具体的PH与稳定性的检测没有做过,根据经验来说 PH偏碱,凝胶后颜色稍白,PH偏酸,凝胶颜色稍暗。
问题5:琼脂粉做碳源测试,不加碳源细菌仍然能生长,上一批次的就不能生长?
答:理论上应该不长,一般微生物都不能利用琼脂粉,但某些杂菌仍可以利用,所以要检测到底是琼脂粉纯度问题还是染了杂菌。

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